厌氧氨氧化是环境领域和微生物领域的一个重大发现,对于认识氮素生物地球化学循环、丰富微生物学理论和开发新型生物脱氮工艺均具有巨大的推动作用.近年来对厌氧氨氧化菌的研究取得了许多突破性成果,探明了个体形态特征、细胞化学组分特征、富集培养与分离特征、生理生化特征以及生态学特征,提出了厌氧氨氧化代谢模型,纯化研究了多种厌氧氨氧化酶,分离获得和分类鉴定了5属9种厌氧氨氧化菌,建立了厌氧氨氧化菌科(Anammoxaceae).本文系统介绍了厌氧氨氧化菌的特性,详细描述了9种已被鉴定的厌氧氨氧化菌.

通过对浙江和安徽部分地区水稻上潜根线虫(Hirschmanniella spp.)的采集及分离,根据形态学特征和形态测量值等,共鉴定出3个种:水稻潜根线虫(H.oryzae)、尖突潜根线虫(H.mucronata)和细潜根线虫(H.gracilis).不同地理群体的水稻潜根线虫和尖突潜根线虫除个别测量值外其他各值均在模式标本的参考值范围内,而细潜根线虫各项测量值普遍偏小于模式标本.细潜根线虫为浙江省内首次报道.

为研究倍性变化对水稻植株茎结构的影响,以粳稻FC311和FC322为供试品系,应用流式细胞术从花培后代中鉴定出6份不同倍性的材料(FC311中的单倍体、二倍体及三倍体;FC322中的单倍体、二倍体及四倍体),利用石蜡切片法观察并比较不同倍性植株茎的解剖结构.结果表明:供试材料节间维管束数及大小、茎壁面积、维管束面积通常与倍性的增加有关,显示明显的基因剂量效应;而表皮下和内、外圈维管束鞘的厚壁细胞层数、发育特征及细胞淀粉粒含量等结构和特性,与倍性变化无明显相关;在FC322 四倍体植株第1节间中,还观察到颇为少见的2层厚壁组织结构.

以子囊菌油脂酵母(Lipomyces tetrasporus) NRRL Y11562为出发菌株,经紫外诱变选育出1株高产油脂的优良酵母UV5菌株.对该菌种的发酵培养基和发酵条件进行优化,发现当以葡萄糖为碳源,硫酸铵为氮源,C/N为308,接种量为10%,初始pH为6.5,培养温度为28 ℃,培养96 h时,油脂产率最高,达9.09g·L-1.用气相色谱法对发酵得到的油脂进行脂肪酸组成分析,结果显示该突变株产生的油脂主要由软脂酸(C16:0)、棕榈油酸(C16:1)、硬脂酸(C18:0)、油酸(C18:1)和亚油酸(C18:2n-1)组成,其脂肪酸组成与植物油近似.

从杜长大断奶仔猪背最长肌中克隆肌红蛋白(Mb)基因的部分序列并探讨甘氨酸铁对其表达的影响.从仔猪背最长肌提取总RNA,用RT-PCR扩增Mb基因,获得1条约335 bp的片段,以pGEM-T Easy为载体,将该基因片段克隆到大肠杆菌 (Escherichia coli) DH5α中.从筛选的阳性克隆中分离出Mb基因,测定其序列.分析表明,该片段为Mb cDNA的部分序列,编码111个氨基酸组成的多肽.研究得到的基因片段与报道的猪背最长肌Mb cDNA部分序列相似性达到99%.以Mb基因片段克隆为基础,构建优化的半定量RT-PCR法,以18S rRNA为内标,研究不同甘氨酸铁添加量对Mb基因表达的差异.结果表明,与对照组相比,饲养35 d后,60、90和120 mg·kg-1甘氨酸铁组(以铁计)仔猪背最长肌Mb的相对表达量增加了97.35%、108.87%和86.17%(P<0.05).据此认为,甘氨酸铁在一定程度上可以调控肌红蛋白基因表达,改善肉色.

以体外培养的猪原代脂肪细胞为研究对象,研究瘦素(leptin)对猪脂肪细胞脂滴相关蛋白(perilipin、ADRP、TIP47)和脂肪生成相关酶(FAS、SCD α、ACC α)mRNA表达的影响.用0、50、100、150 nmol·L-1 leptin 分别处理脂肪细胞 3、6 h,油红O染色鉴定,RT-PCR检测.结果表明,当用150 nmol·L-1 leptin 处理猪脂肪细胞 3 h 时perilipin mRNA 表达显著降低,用50、100 nmol·L-1 leptin处理 3 h时 PPAR γ、ACC α、FAS mRNA 表达降低;当用50、100 nmol·L-1 leptin 处理猪脂肪细胞6 h 时 perilipin、SCD α、PPAR γ、FAS、ACC α、LXR α mRNA 表达降低,50、100、150 nmol·L-1 leptin 处理显著下调ADRP mRNA的表达,100、150 nmol·L-1 leptin处理TIP47 mRNA表达升高.以上结果提示,50、100 nmol·L-1 leptin 可能通过抑制 PPAR γ和 LXR α来抑制 perilipin、SCD α、FAS、ACC α mRNA 的表达,从而调控猪原代培养脂肪细胞中的脂质代谢,而150 nmol·L-1 leptin 可能引起 leptin 的抵抗进而削弱 leptin 的调控作用.

为了研究鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的生物学功能,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从刀豆蛋白(ConA)刺激的四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞中扩增出GM-CSF基因,进一步通过PCR等方法将该基因亚克隆入真核表达载体pCI-neo,构建出重组表达质粒pCI-GM-CSF,将pCI-GM-CSF转染COS-7细胞,提取表达产物进行活性检测.序列测定表明,四川山地乌骨鸡GM-CSF全基因长为435 bp,编码144个氨基酸,与GenBank 上公布的瓦赫宁鸡GM-CSF基因(AJ621740)氨基酸序列同源性达95.1%,与其他哺乳动物GM-CSF基因的氨基酸序列同源性低于30%.骨髓细胞增殖实验证实四川山地乌骨鸡GM-CSF能明显促进鸡骨髓细胞的增殖.以上结果表明,本实验成功克隆了四川山地乌骨鸡GM-CSF基因,证实四川山地乌骨鸡GM-CSF重组蛋白具有明显的生物学活性.

探讨骨髓基质细胞诱导的神经干细胞移植至海人酸(kanic acid,KA)致痫大鼠海马后对学习记忆障碍的改善作用,从而为干细胞移植治疗癫痫提供理论依据.体外分离大鼠骨髓基质细胞,并在特定条件下培养、诱导分化为神经干细胞.在海马内注射KA建立大鼠癫痫模型,之后把诱导的神经干细胞移植至KA致痫鼠的海马内,用Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,用PCR方法检测海马内NSE、c-fos和SEZ-6基因表达,采用Western blot技术检测海马内NSE、C-FOS和SEZ-6蛋白表达.结果显示:骨髓基质细胞成功诱导分化为神经干细胞,诱导分化的神经干细胞移植到脑内可明显改善大鼠的学习记忆障碍;移植组大鼠海马内NSE、c-fos和SEZ-6基因表达下调,NSE、C-FOS和SEZ-6蛋白表达亦下调,与阳性对照组及假移植组比较,差异显著(P<0 05).说明骨髓基质细胞诱导的神经干细胞移植至KA致痫大鼠海马后对学习记忆障碍有明显的改善作用,其机制可能与NSE、c-fos、SEZ-6基因和蛋白的表达下调相关.

为开发新的蚊虫监测技术,在室内及模拟野外环境下测定5种颜色(亚甲基蓝、亮蓝、胭脂红、果绿和柠檬黄)和10种化合物(乙酸、丙酸、己酸、庚酸、乙酸乙酯、丁酸乙酯、二甲基二硫醚、L-乳酸、氨水和1-辛烯-3-醇) 引诱白纹伊蚊雌蚊产卵的效果.结果表明,白纹伊蚊在含亚甲基蓝、亮蓝和胭脂红的蒸馏水中的产卵量显著多于蒸馏水;在供试的10种化合物中,0.001 mg·L-1的乙酸溶液、0.01mg·L-1的丙酸溶液、0.01 mg·L-1的乙酸乙酯溶液及0.01～1 mg·L-1的1-辛烯-3-醇溶液对白纹伊蚊表现出显著的产卵引诱作用;模拟野外试验表明,颜色与化合物以室内最佳诱卵浓度混配时,颜色因素表现出更为明显的诱卵作用,这说明在野外条件下供试化合物也许需要更高的浓度才能对白纹伊蚊起引诱作用.

以3个主栽烤烟品种为材料,分析植株不同部位叶片的光合作用、叶绿素荧光参数以及与碳氮代谢有关的硝酸还原酶(NR)和蔗糖转化酶(INV)活性,以明确烤烟不同部位烟叶品质差异的生理机制.结果表明:打顶至此后40 d内,净光合速率(Pn)、气孔导度(gs)、蒸腾速率(Tr)在3供试品种中均表现为上部叶显著大于下部叶,且随着生育进程而下降,但下降速度因品种和叶位而异;叶绿素含量(SPAD值)在各品种间差异显著,但均表现为上部叶大于下部叶,且在生育过程中呈下降趋势,品种K326在后期的下降幅度明显大于品种云85和云87;量子产量(Fv/Fm)在品种间差异明显,云87在后期下降快于其他2个品种,下部叶片在生育期间的差异大于上部叶片,表现为打顶后先增大,后期变小;硝酸还原酶活性在生育期间呈下降趋势,3个供试品种之间差异明显,以K326的NR活性最大;各品种的蔗糖转化酶活性在上、下部叶片之间存在着很大的差异,品种间以K326的差异最小.上述结果表明,烟叶光合特性和相关酶活性在不同叶位间存在着很大的差异,而这种差异程度因品种而异.

分析测定诺丽叶中的主要营养与功能性成分,并采用过氧化氢体系、超氧阴离子体系、羟基自由基体系和Oyaizu法,分别对诺丽叶水提取物(water extract,WE)、石油醚提取物(petroleum ether extract,PEE)、乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract,EAE)、氯仿提取物(chloroform extract,CE)、正丁醇提取物(n-butanol extract,BE)和Vc的抗氧化活性进行测定和比较.结果表明:诺丽叶不仅具有较高的营养和功能价值,还具有一定的抗氧化性质,对H2O2的清除能力依次为Vc>BE>CE>EAE>PEE>WE;对O2-·的抗氧化活性依次为Vc>BE>EAE>WE>PEE>CE;对·OH的抗氧化活性依次为Vc>BE>CE>EAE>PEE>WE;而其还原能力强弱顺序依次为BE>EAE>WE>PEE>CE.5种提取物均具有一定的抗氧化性,随着浓度的增加而提高;且在不同的自由基产生体系中,对几种自由基均有不同程度的清除作用.

比较白玉仙茶的2个变种白玉仙茶1号、白玉仙茶2号与其母本白玉仙茶以及当地主要茶叶品种鸠坑和安吉白茶(白叶茶1号)的化学成分和抗氧化酶活性[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)及多酚氧化酶(PPO)]的差异;研究惠明寺和天堂湖2个不同生态环境和春夏2个不同嫁接时间对这2种茶叶品质的影响.结果显示:白玉仙茶1号的蛋白质、水溶性糖、儿茶素等品质成分含量比其他品种高14.9%～32.1%;白玉仙茶2号的氨基酸含量比其他品种高16.1%～21.8%,且酚氨比低16.0%～33.3%,而色差值显示白玉仙茶2号浸提液的DA值(红度)最大,DB值(黄度)最小,即黄绿色最淡;此外,白玉仙茶1号、白玉仙茶2号中的SOD活性比鸠坑和安吉白茶高6.2%～9.4%,表明它们可能具有较强的抗逆性.对不同产地的比较发现,天堂湖茶叶中各种品质成分的含量比惠明寺的高出5.9%～80.2%,但酚氨比也高11.2%～15.8%,天堂湖白玉仙茶2号的汤色DA值比惠明寺的低17.3%,DB值高20.7%,更偏黄绿;但白玉仙茶1号、白玉仙茶2号的抗氧化酶活性在2个不同环境中无显著性差异.对不同嫁接时间的比较发现,春天嫁接比夏天嫁接更有利于茶叶中主要化合物的积累.白玉仙茶1号在春天嫁接,各品质成分含量比在夏天嫁接提高了27.4%～42.2%,汤色的DA值增大了6.0%,绿度较浅,而白玉仙茶2号在春天嫁接,水溶性糖可多出47.4%,汤色DA值减小了12.5%,DB值增大了16.5%,较为黄绿;嫁接时间对这2种茶叶的抗氧化酶活性没有显著影响.

应用MMF方程对3个大麦品种籽粒发育期间的植酸累积过程进行拟合分析,并研究其与蛋白质、总磷含量动态累积之间的关系.结果表明:籽粒发育期间,供试大麦品种的植酸含量随时间变化过程符合"S"型曲线,累积速率变化则呈"慢-快-慢"的单峰曲线,累积高峰出现在花后13～14 d;不同大麦品种的植酸累积特征存在着一定的差异,裸大麦品种CAW453的植酸累积持续时间较2个皮大麦品系(03-34和06-08)短,但其累积速率的变化幅度较大.相关分析结果表明:籽粒发育期间植酸含量和粒质量变化之间呈显著正相关;植酸累积动态并不受蛋白质和总磷含量的影响,其合成速率与蛋白质、总磷累积速率之间关系不密切.本研究结果显示,大麦籽粒中植酸和磷的累积机制可能彼此独立,在大麦籽粒发育期间可能存在着比植酸合成更为活跃的其他磷代谢行为.

为了解能够表征盐胁迫下小麦叶片细胞膜变化的一些电参数特性,应用电阻抗图谱方法研究小麦叶片对不同盐浓度溶液胁迫的反应,拟合叶片的胞外电阻、胞内电阻、弛豫时间及弛豫时间分布系数,分析盐浓度和胁迫时间对各个电阻抗图谱参数的影响以及这些参数彼此之间的相关性.结果表明:随着盐浓度和胁迫时间的增加,胞外电阻和弛豫时间表现为先增加后减小或者逐渐减小的变化趋势;在胁迫时间小于12 h或者盐浓度小于100 mmol·L-1时叶片的胞外电阻变化较剧烈,胞内电阻和弛豫时间分布系数先减小后增大;4个电阻抗图谱参数在时间上的差异极显著,在浓度上的差异只有胞内电阻不显著,其他参数均为极显著;胞外电阻和弛豫时间呈极显著正相关,与弛豫时间分布系数呈极显著负相关,弛豫时间与弛豫时间分布系数呈显著负相关.

通过盆栽试验研究青菜-萝卜轮作条件下2种不同类型人为镉污染土(红黄壤和小粉土)中不同处理对土壤微生物活性及磷脂脂肪酸(PLFAs)特性的影响.结果表明:蔬菜轮作条件下,2种土壤外源镉含量<1.00 mg·kg-1时,土壤微生物生物量碳增加,土壤基础呼吸作用略有减弱;随着外加镉浓度的增加,微生物生物量碳呈下降趋势,呼吸作用加强.种植萝卜后红黄壤微生物生物量碳含量降低,小粉土微生物生物量碳增加;2种土壤的基础呼吸速率均降低.不同蔬菜轮作对镉-微生物活性之间互动关系的影响不大.对磷脂脂肪酸图谱的分析结果表明,土壤微生物群落对镉胁迫较为敏感.真菌、革兰氏阳性菌以及灌木菌根真菌(AMF)随土壤镉含量的增加而增加,细菌、革兰氏阴性菌、放线菌则随土壤镉含量的增加而下降.真菌对镉胁迫的耐性最好,放线菌对镉胁迫最敏感.不同土壤类型、根际非根际土壤的PLFA剖面存在较大差异.根际土壤微生物受镉胁迫相对较小,群落结构较为稳定.对PLFAs的主成分分析结果表明,种植萝卜后土壤微生物群落结构更趋稳定.

选用60只雄性断奶仔兔随机分为4组,对照组饲喂基础日粮,PAS38组在基础日粮中添加0.1%腊样芽孢杆菌PAS38制剂,甘露聚糖组在基础日粮中添加0.2% β-甘露聚糖制剂,菌糖混合组在基础日粮中分别添加0.1% PAS38制剂和0.2% β-甘露聚糖制剂.家兔饲喂至第15、30、45天时每组宰杀5只,采用免疫组织化学SABC法检测家兔小肠中生长抑素(SS)、5-羟色胺(5-HT)阳性细胞数量和表达.结果表明:PAS38制剂和甘露聚糖制剂均减少家兔小肠中SS阳性细胞的数量和降低SS细胞的表达强度,增加小肠中5-HT阳性细胞数量和提高5-HT细胞的表达强度;两者联合应用效果更加明显,与对照组相比具有显著或极显著差异(P<0.05或P<0.01),表现出一定的协同效应.

通过单药纸片搭桥试验、复合药物纸片试验、单药最小抑菌浓度(MIC)测定、联合药敏试验、Kirby-Baueer试验,研究复方阿莫西林纳米乳(AMX-LH-NE)对奶牛乳房炎3种主要病原菌的体外联合抗菌效应.结果表明:阿莫西林(AMX)和盐酸左氧氟沙星(LH)联用时表现为协同抗菌作用;二者联用时对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的MIC分别是单用时的1/4倍和1/8倍,对无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的MIC均是单用时的1/4倍,对大肠杆菌(Escherichia coli)的MIC 均是单用时的1/8倍;二者联用对3种病原菌的部分抑菌浓度(FIC)指数均不大于0.5;AMX-LH-NE对3种病原菌的抑菌圈直径与其他各组相比,差异均极显著(P<0.01).结果提示,AMX-LH-NE对奶牛乳房炎主要病原菌的联合抗菌活性强.