大多数与花发育相关的功能基因属于MADS基因家族.应用CodonW的因子分析表明,拟南芥MADS转录因子家族偏好使用A、U结尾的密码子,而水稻MADS转录因子家族偏好使用G、C结尾的密码子.同时通过氨基酸序列的多重比对,表明密码子偏好性与氨基酸序列及二级结构之间存在关联,证实了不同的密码子编码的氨基酸位于蛋白质二级结构的特定位置.

以4个典型品质类型的早籼水稻品种为材料,利用差示扫描量热分析仪(DSC)和淀粉粘度测定仪(RVA),对其在不同播期种植条件下的脱脂米粉样品与未脱脂米粉样品的DSC热谱和粘度特征值进行了比较分析.结果表明:脱脂米粉样品与未脱脂米粉样品在起始温度(To)、峰值温度(Tp)、终结温度(Tc)上的差异不明显,两者的DSC热谱差异主要表现在热焓值(⊿T)上,经脱脂处理后米粉样品在糊化过程中的热焓值(⊿T)较其未经脱脂的对照样品显著降低;在RVA粘度特征上,稻米米粉经脱脂处理后崩解值(Breakdown)明显升高,消减值(Setback)有所降低,而其在最高粘度(PV)、热浆粘度(HS)、最终粘度(FV)和回冷恢复值(Consistence)上的变化特征则不甚明显.

应用灰色系统理论,通过对亚热带地区试种的14个紫花苜蓿品种的鲜草产量、株高、分蘖数、根长、叶茎比,蛋白含量等指标进行分析,建立了紫花苜蓿品种综合评估模型,并对其生产性能进行了综合评估.结果表明,WL-323HQ在综合评估模型中得分最高,综合生产性能最好,该品种在亚热带地区生态条件下,是最适宜推广栽培的品种.根据对各项指标的权重比较,其权重顺序为:株高＞蛋白含量＞分蘖数＞根长＞叶茎比＞鲜草产量.

采用农杆菌介导法将双元载体质粒pBI35S-AMF分别导入"上海青"白菜和"油青"菜心,对影响转化频率的抑菌剂和感染菌株等主要因素进行比较,优化了白菜类蔬菜的遗传转化体系.结果表明,在白菜类蔬菜的遗传转化体系中,选择氨苄青霉素作为转化农杆菌的抑菌剂为好,其抑菌浓度以300 mg/L为宜;预培养时间和共培养时间分别以3 d和2 d为适;LBA4404/pBI35S-AMF菌株的感染效率远高于EHA105/pBI35S-AMF.对KanR转化植株做进一步的分子检测结果显示,Southern印迹杂交阳性率为82.2%,转化频率达2.8%,且外源片段为多拷贝插入.多批次的转化结果证实,该体系的转化频率稳定.

以早熟花椰菜品种丰喜45天'为材料,在花球开始形成期进行遮荫处理,以研究遮荫对花球生长和抗氧化系统的影响.结果表明:(1)遮荫处理使花椰菜花球纵径、横径和鲜重分别比对照减少17.97%、18.9%和38.59%.(2)除了叶片中愈创木酚过氧化物酶(G-POD)活性显著提高外,遮荫处理降低了花椰菜叶片、花蕾和花茎中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和G-POD的活性,但与叶片相比,花蕾和花茎中这些酶活性的下降幅度较小.(3)遮荫处理显著降低了花椰菜叶片、花蕾、花茎中脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)和谷胱甘肽还原酶(GR)的活性.(4)遮荫处理降低了花椰菜叶片、花蕾和花茎中抗坏血酸含量(花蕾中还原型抗坏血酸除外)和叶片中谷胱甘肽含量,但花蕾和花茎中谷胱甘肽反而有所提高(花茎中还原型谷胱甘肽除外).

采用三因子三水平正交试验得出甘薯黄酮最佳提取条件为70%乙醇,1:60料液比,80℃水浴下回流浸提1 h.在此条件下,一次提取工艺得率可达87.15%.同时分析并比较了不同品种甘著的总黄酮含量,发现紫甘薯块根黄酮类物质含量最高.

根据现代林业和浙江省木材资源缺乏的实际要求,选择一类生态和经济效益俱优的森林类型进行持续经营.应用景观生态学的原理,对浙江最优化的森林类型--马尾松阔叶树混交林的经营进行了研究,提出了该类型的经营模型,同时对浙江林农对马尾松林的习惯经营状况进行了分析.本文的研究可为浙江森林现实经营提供选择和经营方法.

为了研究番茄抗青枯病育种的生理基础,对差异很大的两个品种接种青枯病菌(Ralstonia solanacearum),分析其品种间与防卫系统相关的动态变化.结果表明,受青枯菌侵染后,抗病品种T51A的苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性高于对照,而感病品种T9230的却与对照一致;抗病品种T51A的超氧化物歧化酶(SOD)活性高于对照,其峰值比对照高16.12%,而感病品种T9230的却低于对照,其峰值低于对照25.14%;抗病品种T51A与感病品种T9230的多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)活性变化无明显差异;抗病品种T51A抑制叶绿素含量下降的能力及保持较高胡萝卜素含量的能力明显强于感病品种T9230.

对六株嗜水气单胞菌的全细胞和外膜成份在不同的培养条件下进行SDS-PAGE、免疫转印分析.在同一培养条件下6个供试菌株全细胞的蛋白质电泳图谱不同.同一菌株在五种不同的培养条件下,其蛋白质电泳图谱相似但有差异.6株菌株的细菌外膜提取物的蛋白质电泳图谱不同,同一菌株在5种不同的培养条件下,其蛋白质电泳图谱相似但有差异,但所有的图谱均具有34 kDa和30 kDa的条带.用Schiff's试剂,银染及生物素标记(BS-1,ConA,UEA-1)法测定及分析提取物中糖或碳水化合物的特征.生物素标记及经蛋白酶K处理后的所有菌株的提取物均显示不同分子量碳水化合物的条带,但具有相同分子量的条带,其中32 kDa条带被三种生物素及银染所显示,而34 kDa仅被生物素BS-1和UEA-1所识别.经Schiff's试剂染色后,仅出现少量的条带.用免疫转印法测定菌体提取物的抗原性,结果显示,提取物有多条不同的条带被两种血清所识别,且用活菌制备的血清比死菌的要强得多.所有菌株在不同培养条件下的提取物均具35 kDa条带被鱼血清所识别.所以,35 kDa条带可能是嗜水气单胞菌的共同抗原.同时,用ELISA法测定,证明鱼血清与其它菌株间有较强的交叉反应.

本论文研究了菩提子/美人蕉-黑麦草人工湿地生态工程在杭州气候条件下,净化流入西湖污水的效果,比较了不同季节、不同水力负荷条件下系统的净化效果及其间的差异.结果表明该湿地对总氮(TN)、化学需氧量(COD)、生化需氧量(BOD5)的总去除率在40%～50%之间,总磷(TP)的去除率在60%～70%之间,氨氮(NH4-N)的去除率达90%以上.春夏季的净化效果优于秋冬季,全年TN、TP、COD、BOD5的最低去除率分别保持在30%、60%、40%、35%左右.在同一时期不同的水力负荷(200～1200 mm/d)下系统净化效果无明显差异.

室内测定了水葫芦Eichhornia crassipes(Mart.)Solms.乙醇提取物对小菜蛾Plutella xylostella L. 3龄幼虫的生物活性.结果表明,水葫芦提取物能使小菜蛾幼虫取食量、体重增加量减少,幼虫死亡率增加.提取物浓度越高,这些作用效果越明显.在选择性和非选择性的条件下,水葫芦提取物对3龄幼虫的拒食中浓度(AFC50)分别为66.09g/L和293.35 g/L.

研究了4种外植体、10种不同浓度激素组合对薇甘菊(Mikania micrantha H.B.K.)离体再生的影响,并对胚性愈伤组织中的体细胞胚发生发育过程进行了组织细胞学观察.结果表明,所用不同浓度激素组合的培养基均能诱导薇甘菊外植体产生愈伤,培养基以MS+6BA 1 mg/L为最宜;不同种类的愈伤组织再分化结果有明显差异,生长良好的胚性愈伤组织转入分化培养基后可诱导体细胞胚的发生.薇甘菊体细胞胚胎发生的形式为单细胞内起源.体细胞胚起源于胚性愈伤组织的胚性细胞,胚性细胞经过一次不均等分裂产生两个细胞,即胚细胞和胚柄细胞.然后依次经过具胚柄的多细胞原胚,再经过球形胚、心形胚、鱼雷胚阶段,发育成具有子叶的成熟胚状体,然后长成为再生植株.

以铁皮石斛离体根尖为外植体,研究了在不同培养条件下离体根尖经愈伤组织形成体细胞胚及直接产生体细胞胚再生植株的细胞学过程,认为铁皮石斛类原球茎是单细胞起源的真正体细胞胚.

研究了不同水分处理对水稻各生长发育时期的影响,确立了水稻叶水势与不同水分处理之间的变化规律与相关关系,并在不同水分条件下水稻叶水势动态变化特征的基础上,建立了温度、光照、水分与叶水势的定量关系及各不同生长发育时期的叶水势变化规律.通过这些量化关系可以与实测叶水势相结合,实现较快地得到水稻叶水势的值,从而判定其是否出现了水分亏缺,以利于及时准确地对水稻进行灌溉.与此同时,得出了两个品种水稻(中9B,金早47)在主要生育期用于判断水分亏缺状况的临界叶水势值,为水稻的节水灌溉提了依据.

通过工蜂蛹及其水提物和醚提物对小鼠肉芽肿模型、大鼠佐剂性关节炎模型的作用和对肾上腺中VC及胆固醇含量的影响实验,研究工蜂蛹对慢性炎症和免疫性炎症的作用及其机理.结果发现,工蜂蛹及其中、高剂量的水提物均对小鼠棉球肉芽肿有显著的抑制作用,对大鼠佐剂型关节炎模型的原发性病变和继发性病变具良好的对抗作用,能抑制细胞因子IL-6及炎症介质PGE2的生成,明显改变肾上腺中的胆固醇和Vc含量,并能有效地防止造模期间体重的减轻,且对肾上腺和胸腺指数无明显影响;但中高剂量的醚提物对模型的影响效果不明显.表明工蜂蛹发挥抗炎及免疫作用的大部分活性物质可能存在于其水提物中,其作用机制可能是通过作用于肾上腺皮质系统而发挥抗炎作用.抑制单核巨嗜细胞的活化和分化,抑制炎症介质的产生是工蜂蛹发挥抗炎和免疫调节作用的机理之一.

根据全国已经报道的地氟病发生率和土壤氟的相关资料,对我国氟的土壤环境质量指标与人体健康关系的研究进行了总结与分析,探讨了氟的土壤健康质量指标,包括我国土壤中全氟和水溶态氟的土壤环境质量指标确定和评价方法.

畜禽废弃物的基质化处理试验采用木屑、茶渣和药渣为调理剂,分别配合0、20%、30%、40%质量比的猪粪,进行有机基质的腐熟对照实验.在整个腐熟周期,各组堆料的主要理化指标(堆温、pH值、电导率(EC)、有机质、全碳(TC)、全氮(TN)、全磷(TP)和总孔隙率等)随堆制时间呈现一定的变化规律.综合堆料的堆温变化、发酵周期和设施无土栽培对有机基质的理化指标要求,30%猪粪含量的腐熟后的有机基质,其理化性质比较适合作物栽培,腐熟周期适于工厂化生产.

采用强制通风静态筒堆肥系统,测量不同通风量下的堆体内的耗氧速率和氧气浓度,对堆肥过程中不同通风量下耗氧速率的差异、氧气浓度的动态变化进行了分析.结果表明,堆肥过程中耗氧速率和含水率有很大的关系,含水率偏高,耗氧速率下降,本实验中耗氧速率先降后升再下降,后期下降不明显;在整个堆肥过程中,堆体内的氧气浓度总体呈上升趋势,中后期氧气浓度增加比前期明显;停止通风后5 min内氧气消耗速率最快,之后消耗速度缓慢;本系统的最佳通风量为0.35 m3/min.

用马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得2株能稳定传代并分泌抗PVX单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞2B12和4E7,并分别制备它们的单抗腹水.2株单克隆抗体腹水间接ELISA效价在10-6以上,2B12和4E7的抗体类型及亚类均为IgG1,轻链均为κ链.利用这些单克隆抗体建立了抗原包被的间接ELISA(ACP-ELISA)检测PVX的方法.病叶经1:600倍稀释、提纯PVX病毒浓度为2 ng/mL(每孔的病毒绝对量为0.2 ng)时,该方法仍能检测到病毒.利用ACP-ELISA方法测定了田间样品,发现PVX在马铃薯上发病很普遍.

将融合6个组氨酸(6×his)序列的hGM-CSF基因插入杆状病毒转移载体pBacPAK8中得到杆状病毒重组转移载体pBacPAKHis-GM-CSF,pBacPAKHis-GM-CSF DNA与线性化病毒BmBacPAK6 DNA共转染BmN细胞,获得了表达rhGM-CSF融合蛋白的重组病毒vBacPAKHis-GMCSF.用重组病毒感染家蚕五龄起蚕,分别在24、48、72、96、120 h和144 h剪腹足取蚕血淋巴,ELISA法测得rhGM-CSF融合蛋白在120 h的蚕血淋巴中表达量最高,约为15μg/mL蚕血淋巴.融合蛋白通过Poly-His Protein Purification Kit纯化.SDS-PAGE和Western blotting分析表明,表达产物是3种糖基化程度不同的,分子量分别约为18、20、31 kD的蛋白质.

杂色曲霉素在自然界广泛存在,毒性强,可经过多种途径吸收,诱发人和动物产生肿瘤,从而造成极大危害.本研究旨在寻找快速简单的方法测定饲料中的杂色曲霉素,通过蒸馏,提纯,浓缩及荧光显色,发现甲醇法和乙腈法都可以简便快速地检测饲料中的杂色曲霉素.

根据枯草芽孢杆菌WHNB02植酸酶phyC基因全序列设计一对引物,采用PCR法从含有该基因的pUC18-phyC质粒上获得不含有信号肽序列的phyC基因表达片段,亚克隆到毕赤巴斯德表达载体pPIC9K的多克隆位点,并电转化毕赤巴斯德酵母GS115.经MD和MM平板筛选、酶活性测定,获得了阳性转化子PP9KC.首次在毕赤巴斯德酵母中实现了有生物学活性芽孢杆菌植酸酶的分泌表达,去糖基化试验表明该植酸酶的分子量为53.5 kD和50.9 kD糖基化程度不同的两种糖蛋白.用麦芽汁半合成培养基对PP9KC进行诱导培养,培养48 h后酶活可达到2453 U/mL,表达量为出发菌株的10.5倍.酶学性质分析表明,其酶促反应最适pH值为7.0,最适反应温度为65℃,经90℃处理10 min,残留酶活性为37℃时的78.2%.

将含浸麻芽孢杆菌β-葡聚糖酶基因的重组克隆质粒进行亚克隆,用Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切后,与相同酶切的表达载体pET-30a相连接,构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21中表达.蛋白质电泳结果表明在25.0 kD处有表达带,酶活力达60.4 U/mL,为出发菌的30多倍.酶特性研究表明:该酶的最适温度为50℃,最适pH为5.0～7.0;在50℃以下及在不同的pH下(pH 3.0～9.0)处理后较稳定.

以亚硒酸钠为对照,研究了纳米硒对肉鸡肝脏谷胱甘肽过氧化物酶和脱碘酶Ⅰ活性的影响.健康Avian商品代公母混合雏1485羽按饲养试验要求分为11组,每组3个重复,每个重复45羽.将纳米硒和亚硒酸钠2种硒源分别以0.10、0.20、0.30、0.40、0.50 mg/kg 5个硒水平添加到基础日粮中,配制成10种试验日粮,并以基础日粮作对照.结果显示:亚硒酸钠添加浓度在0～0.20 mg/kg,肉鸡生长性能和GSH-Px活性随着硒添加浓度的增加而提高;在0.20～0.40 mg/kg硒添加水平范围内处于高峰平台;0.50 mg/kg硒添加水平肉鸡生长性能和GSH-Px活性显著低于0.20～0.40 mg/kg硒添加水平(P＜0.05).纳米硒添加浓度在0.50 mg/kg,肉鸡生长性能和GSH-Px活性仍然保持在高峰平台.硒源添加浓度在0.10～0.40 mg/kg时,亚硒酸钠和纳米硒对肉鸡生长性能和GSH-Px活性的影响无显著差异(P＞0.05);硒源添加浓度在0.50 mg/kg时,纳米硒组肉鸡生长性能和GSH-Px活性显著高于亚硒酸钠组(P＜0.05).基础日粮组肝脏脱碘酶Ⅰ活性显著低于各硒源的各硒添加水平(P＜0.05),硒源和硒添加水平对脱碘酶Ⅰ活性没有显著影响(P＞0.05).上述结果提示,纳米硒的Weinberg剂量-效应的最适剂量范围宽于亚硒酸钠.

将编码绿色荧光蛋白(GFP)的基因融合到单核细胞增多性李斯特菌actA基因启动子和信号肽下游,应用同源重组技术构建了含gfp的重组李斯特菌突变株.PCR扩增及其产物的酶切鉴定均证实目的基因gfp融合到李斯特菌基因组中.荧光显微镜下可见重组菌体发绿色荧光.SDS-PAGE电泳和免疫印迹结果显示重组李斯特菌表达的GFP分子量约为28 kD,与预计的分子量大小一致.重组菌对鸡胚和小鼠的毒力以及对体外培养细胞的侵袭力均低于野生型李斯特菌.该重组菌可用于研究李斯特菌的致病机理和食品加工过程中微生物污染控制的指示性细菌.

乳链菌肽产生菌中乳链菌肽编码基因、乳链菌肽抗性基因和蔗糖发酵基因紧密连锁.根据该原理,在添加乳链菌肽、蔗糖及溴甲酚紫的M17选择培养基上,从新鲜牛奶样品中定向筛选到6株能在选择培养基上生长的菌株,通过细菌生理生化指标鉴定、16S rDNA序列测定,以及发酵产物的抑菌试验,获得了两株产乳链菌肽的乳酸乳球菌和两株只对乳链菌肽具有抗性但不产生乳链菌肽的乳酸乳球菌.

选取21日龄断奶杜大长仔猪60头(体重接近5 kg),按试验要求随机分成2组,每组设3个重复,每个重复10头.研究饲粮中添加1%谷氨酰胺对断奶仔猪生长的影响.结果表明,试验组在第9 d后腹泻率明显下降,而对照组在整个过程中的腹泻率较高,断奶8～11 d一直维持50%～60%的腹泻率,另外腹泻延续的时间较长,断奶12～15 d仍有20%～30%的腹泻率.断奶1～10 d,试验组料重比比对照降低了12.05%(P＜0.05).断奶11～20 d,试验组日增重比对照组提高27.75%(P＜0.05),试验组采食量、料重比与对照组相近.断奶10 d,试验组血清尿素氮水平比对照组低17.36%(P＞0.05),但对血清总蛋白和血清白蛋白水平无明显影响.断奶20 d,谷氨酰胺对血清尿素氮和总蛋白有一定影响,试验组血清尿素氮水平比对照组低4.26%(P＞0.05),血清总蛋白水平比对照组高18.70%(P＞0.05),谷氨酰胺对血清白蛋白水平无明显影响.饲粮添加谷氨酰胺对T3,T4水平无明显影响,但对生长激素水平有一定的提高作用.

60头"杜长大"三元杂交生长猪,按饲养试验要求分为2组,分别饲以添加0,0.50 mg/kg可乐定的相同饲粮,试验期为43 d.结果表明:在饲粮中添加可乐定能明显改变猪的胴体组成,使瘦肉率和眼肌面积分别提高了5.29%(P＜0.01)和8.41%(P＜0.01),脂肪比率和背膘厚分别降低了9.53%(P＜0.01)和10.34%(P＜0.05),背最长肌、股二头肌、股四头肌重量分别增加了13.77%(P＜0.01)、11.11%(P＜0.05)和8.93%(P＜0.05);使血清中GH和IGF-1水平升高(P＜0.05),尿素氮和甘油三酯浓度降低(P＜0.05),游离脂肪酸浓度上升(P＜0.05);使皮下脂肪组织中苹果酸脱氢酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活力下降(P＜0.01),而激素敏感脂酶活力增高(P＜0.05).

用敲击振动的方法评价柑桔品质时,由于柑桔的质量、密度、坚实度、糖度以及pH等因素都影响敲击响应主频率,且各因素与响应主频率之间的关系呈非线性,用传统的方法难以分析两者之间的关系.本文应用灰色关联分析方法,计算了各种成熟度柑桔敲击响应主频率与各影响因素之间的灰色关联度,并对计算结果进行相应的理论分析.结果表明:即使柑桔的成熟度不同,坚实度始终是影响敲击响应主频率的首要因素,而pH的影响程度为最小.灰色关联方法为分析响应主频率与其影响因素之间的关系提供了一种有效的综合分析新方法.

研究了棉杆成型块等生物质固体燃料在小型移动层上吸式热解燃烧炉中的热特性.结果表明,密度较大的棉杆成型块升温速率和降温速率均较低,挥发份的逸出时间增加,高温燃烧时间延长,炉子的热效率提高.棉杆成型块在炉胆中的充填量对可燃气体的稳定燃烧和高温火焰的持续时间影响显著.填满炉胆的棉杆成型块的燃烧性能优于棉杆,其燃烧热效率达39.3%,为棉杆的1.72倍.

针对传统油耗仪的缺陷,利用虚拟仪器技术设计了一种发动机油耗测试系统.该系统是在原有发动机性能检测系统基础上扩充的一种智能化瞬态油耗仪系统,由重量传感器、油箱、充油电磁阀及各路油管组成.重量传感器输出的信号经信号调理电路输入6024E的模拟通道,经计算机分析处理;充油电磁阀的控制信号由6024E的数字通道输出,将油路切换成充油状态和测量状态.设计中主要结合失重原理和瞬时流量概念,使系统不仅有较高的测量精度,还能实时显示瞬时油耗和平均油耗.利用虚拟仪器技术将油耗仪与发动机性能测控系统有机地结合在一起,使系统不仅可实时显示发动机检测过程中的转速、扭矩和功率波形,还可实时显示发动机做变工况实验时的转速、扭矩、功率与瞬时油耗率的变化曲线.